꼭 알아야 할 8가지 유형의 단백질 태그
이번 포스팅에서는 참고하실 수 있도록 일반적인 단백질 태그 8가지 유형에 대해 이야기해보겠습니다.
그의
그의 태그는 가장 인기 있는 단백질 태그 중 하나입니다. His6은 관심 단백질의 C-말단 또는 N-말단에 삽입될 수 있는 6개의 히스티딘 잔기로 구성된 융합 태그를 의미합니다. 태그를 사용하면 정제 및 검출을 용이하게 하는 에피토프를 구성할 수 있으며; 다른 하나는 정제를 용이하게 하는 독특한 구조적 특징(결합 리간드)을 구성하는 것입니다. 히스티딘 잔기의 측쇄는 고체 니켈과 강한 인력을 가지며, 이는 고정화 금속 킬레이트 크로마토그래피(IMAC)에 사용되어 재조합 단백질을 분리하고 정제할 수 있습니다 프로틴그래놀라.
플래그 태그
FLAG 태그가 붙은 단백질은 8개의 아미노산을 코딩하는 친수성 폴리펩타이드(DYKDDDDK)이며, 벡터에 구축된 Kozak 서열은 FLAG와의 융합 단백질을 진핵생물 발현 시스템에서 더욱 효율적으로 만듭니다.
아비태그
15개의 아미노산으로 이루어진 짧은 펩타이드로 단일 비오티닐화 라이신 부위를 갖고 있으며, 이는 기존에 알려진 천연 비오티닐화 서열과 완전히 다르며 목적 단백질의 N-말단과 C-말단에 첨가할 수 있습니다. 융합 발현 후, 비오틴 리가제에 의해 비오티닐화될 수 있습니다. 재조합 단백질을 정제하기 위해서는 친화도가 낮은 단량체성 아비딘 또는 아비딘 유도체를 선택하며, 이는 단백질 분리 및 정제는 물론 단백질 상호작용 연구에도 사용됩니다.
SNAP 태그
SNAP-태그는 인간 O6-메틸구아닌-DNA 메틸 전달(O6-알킬구아닌-DNA-알킬트랜스퍼라제)로부터 얻어졌습니다. SNAP의 활성 티올 부위는 페닐메틸구아닌이 가지고 있는 측쇄 페닐기를 받아들이고 구아닌을 방출합니다. 이 새로운 티오에테르 결합의 공유 결합은 SNAP에 의해 운반되는 표적 단백질이 페닐메틸 그룹에 의해 운반되는 표지를 운반할 수 있게 합니다.
정제 또는 정제되지 않은 SNAP-Tag 융합 단백질과 표면에 페닐메틸구아닌이 고정된 매트릭스를 혼합하면 단백질이 기질과 특이적으로 상호작용하여 공유결합을 형성할 수 있습니다. 융합 단백질은 매트릭스 표면에 간접적으로 고정되어 단백질 기능이나 단백질 정제 에 대한 보다 편리하고 신속한 연구를 달성할 수 있습니다 .
GST(글루타티온 티올트랜스퍼라제)
GST 태그가 붙은 단백질 자체는 해독에 중요한 역할을 하는 트랜스퍼라제이며, 원래 크기는 26 kD입니다. GST 융합 발현 시스템은 대장균, 효모 등의 숙주 세포에서 발현될 수 있는 다양한 융합 단백질의 발현에 널리 사용됩니다. 결합된 융합 단백질은 자연 조건 하에서 10mM 환원된 글루타티온으로 용리되었습니다. GST 태그는 효소 분석이나 면역 분석을 통해 편리하게 검출할 수 있습니다. 태그는 세포외 프로테아제에 의한 분해로부터 재조합 단백질을 보호하고 안정성을 향상시키는 데 도움이 됩니다.